ⅠNl'acidu ucleicuintroduzzione
L'acidu nucleicu hè divisu in l'acidu desossiribonucleicu (DNA) è l'acidu ribonucleicu (RNA), frà i quali l'RNA hè divisu in RNA ribosomiali (rRNA), RNA messenger (mRNA) è trasferimentu RNA (tRNA) secondu e so diverse funzioni.L'ADN hè principarmenti cuncentratu in u nucleu, mitocondria è cloroformu, mentri l'RNA hè principalmente distribuitu in u citoplasma.Cum'è a basa materiale di l'espressione genica, l'estrazione di l'acidu nucleicu ghjoca un rolu estremamente impurtante in a ricerca di biologia moleculare è u diagnosticu moleculare clinicu.A cuncentrazione è a purità di l'estrazione di l'acidu nucleicu affettanu direttamente a PCR successiva, a sequenza, a custruzzione di vettori, a digestione enzimatica è altri esperimenti.
Ⅱ Metudu di estrazione di l'acidu nucleicu è purificazione
① Metudu di estrazione di fenol / cloroformu
L'estrazione di fenol / cloroformu hè un metudu classicu per l'estrazione di DNA, chì usa principalmente dui solventi organici differenti per trattà i campioni, dissolvendu l'acidu nucleicu basatu in l'ADN in a fase acqua, i lipidi in a fase organica è e proteine entre e duie fasi.Stu metudu hà i vantaghji di low cost, alta purità è bon effettu.I disadvantages sò u funziunamentu cumplicatu è longu tempu.
② Metudu Trizol
U metudu Trizol hè un metudu classicu per l'estrazione di RNA.U metudu Trizol hè divisu in a fase aquosa è a fase urgànica dopu a centrifugazione cù chloroformu, in quale l'RNA hè dissolutu in a fase aquosa, a fase aquosa hè trasferita à un novu tubu EP, a precipitazione hè ottenuta dopu l'aghjunzione di isopropanol, è poi purificazione di etanol.Stu metudu hè adattatu per l'estrazione di RNA da tessuti animali, cellule è batteri.
③ Metudu di purificazione di colonna centrifuga
U metudu di purificazione di a colonna di centrifuga pò adsorbisce l'ADN in modu specificu attraversu materiali di adsorption di matrice di siliciu speciale, mentre chì l'RNA è a proteina ponu passà lisciamente, è dopu aduprà u sali altu bassu PH per cumminà l'acidu nucleicu, l'eluzione di u valore di u salinu altu PH per separà è purificà l'acidu nucleicu.I vantaghji sò alta concentrazione di purificazione, alta stabilità, senza bisognu di solvente organicu, è low cost.U svantaghju hè chì deve esse centrifugatu passu à passu, più passi di operazione.
④ Metudu di perle magnetiche
U metudu di perle magnetiche hè di sparte a mostra di tissutu cellulare à traversu u lisatu, liberate l'acidu nucleicu in u campione, è dopu e molécule di l'acidu nucleicu sò specificamente adsorbite nantu à a superficia di a perla magnetica, mentri impurità cum'è proteine è zuccheri sò lasciate in. u liquidu.Attraversu i passi di split tissue cellula, ligame di perle magnetiche cù l'acidu nucleicu, lavare l'acidu nucleicu, l'eluzione di l'acidu nucleicu, etc., l'acidu nucleicu puru hè infine ottenutu.I vantaghji sò u funziunamentu simplice è l'usu di pocu tempu, senza a necessità di centrifugazione di passu.Havi esigenze tecniche bassu è pò rializà u funziunamentu automaticu è massa.A cumminazione specifica di perle magnetiche è acidu nucleicu rende l'acidu nucleicu estratto cun alta concentrazione è purezza.U svantaghju hè chì u prezzu di u mercatu attuale hè relativamente caru.
⑤ Altri metudi
In più di i quattru metudi sopra, ci sò cracking bollente, metudu di sali cuncentrati, metudu di detergente anionicu, metudu ultrasonicu è metudu enzimaticu, etc.
Ⅲ Tipu di estrazione di l'acidu nucleicu
Foregene hà a piattaforma di PCR diretta in u mondu, piattaforma di isolamentu di RNA in doppia colonna (solu DNA + solu RNA).I prudutti principali includenu kit di isolamentu di DNA / RNA, serie di reagenti di laboratori moleculari di PCR è PCR diretti.
① Estrazione di RNA totale
I campioni di estrazione di RNA totali includenu sangue, cellule, tessuti animali, piante, virus, etc. Alta purità è alta cuncentrazione di RNA tutale pò esse ottenuta attraversu l'estrazione di RNA totale, chì pò esse usata in RT-PCR, analisi chip, traduzzione in vitro, clonazione moleculare, Dot Blot è altri esperimenti.
Foregene ligatuKit d'isolazione di RNA
Kit d'isolazione di l'RNA tutale di l'animali--Estrae rapidamente è efficacemente l'RNA tutale di alta purezza è di alta qualità da diversi tessuti animali.
Kit d'isolement d'ARN total cellulaire--L'RNA tutale altamente purificatu è di alta qualità pò esse ottenutu da diverse cellule cultivate in 11 minuti.
Kit d'isolazione di l'ARN totali di a pianta--Estrae rapidamente RNA tutale di alta qualità da campioni di piante cù un cuntenutu bassu di polisaccaridi è polifenoli.
Kit d'isolazione di RNA virali--Isolà è purificà rapidamente l'RNA virali da campioni cum'è plasma, sieru, fluidi di u corpu senza cellule è supernatanti di cultura cellulare.
② Estrazione di DNA genomicu
I campioni di estrazione di DNA genomicu includenu terra, feci, sangue, cellule, tessuti animali, piante, virus, etc. L'estrazione di DNA genomicu pò esse usata in a digestione enzimatica, a custruzzione di a biblioteca di DNA, a PCR, a preparazione di l'anticorpi, l'analisi di ibridazione Western blot, chip di gene, alta. -Throughput sequencing è altri spirimenti.
Foregene ligatuKit di isolamentu di DNA
Kit d'isolazione di DNA di tissuti animali- Estrazione rapida è purificazione di DNA genomicu da parechje fonti, cum'è tessuti animali, cellule, etc.
Blood DNA Midi Kit (1-5 ml)--Purifica rapidamente DNA genomicu di alta qualità da sangue anticoagulatu (1-5 ml).
Kit d'isolement d'ADN pour tampon buccal/carte FTA--Purifica rapidamente l'ADN genomicu di alta qualità da campioni di tampone buccale/FTA Card.
Kit d'isolazione di DNA di a pianta- Purificate rapidamente è ottene DNA genomicu di alta qualità da campioni di piante (cumpresi polisaccaridi è campioni di piante di polifenoli)
③ Estrazione di plasmidi
U plasmidi hè un tipu di DNA di molecule circulari in e cellule, chì hè un trasportatore cumuni per a recombinazione di DNA.U metudu di l'estrazione di plasmidi hè di caccià l'RNA, separà u plasmidi da u DNA genomicu bacteriale, è caccià a proteina è altre impurità per ottene un plasmidi relativamente puru.
Mini kit di plasmidi generale- Purifica rapidamente l'ADN plasmidicu di alta qualità da i batteri trasformati per esperimenti di rutina di biologia moleculare cum'è a trasformazione è a digestione enzimatica
④ Altri tipi di estrazione, estrazione di miRNA, etc.
Kit d'isolazione di miRNA animale--Extrae rapidamente ed efficientemente piccoli frammenti di RNA di 20-200nt miRNA, siRNA, snRNA da vari tessuti e cellule animali.
Ⅳ Requisiti per l'estrazione di l'acidu nucleicu è u risultatu di purificaziones
① Per assicurà l'integrità di a struttura primaria di l'acidu nucleicu.
② Reduce l'interferenza di proteine, zuccheri, lipidi è altre macromolecule
③ Ùn deve esse micca solvente organicu o alta cuncentrazione di ioni metallichi chì ponu inibisce l'enzima in campioni di l'acidu nucleicu.
④ RNA è altre contaminazione à l'acidu nucleicu deve esse eliminata quandu l'estrazione di DNA, è vice versa.
Tempu di Postu: 24-Nov-2022
